Coronavirus SARS-CoV-2: Nachweissysteme und Assay-Entwicklung
Das Auftreten neuer Viruskrankheiten, darunter die Coronaviren SARS-CoV-2 (COVID 19), MERS (2015) und SARS (2003), unterstreicht die Notwendigkeit für schnelle und zuverlässige Methoden zur Identifizierung und zum Nachweis der Zielviren in großem Maßstab. Die SARS-CoV-2 Pandemie veranschaulicht auch, wie Forschungsbemühungen zur Entwicklung von Arzneimitteln und Impfstoffen in Zeiten dringenden Bedarfs beschleunigt werden. Die Eindämmung der SARS-CoV-2 Pandemie erfordert eine unmittelbare Unterstützung der Wissenschaft mit Forschungsreagenzien und Testsystemen.
Promega unterstützt Wissenschaftler, die Nachweismethoden entwickeln und Grundlagenforschung betreiben, um die molekularen Mechanismen des SARS-CoV-2 Virus zu verstehen. Unsere Mitarbeiter stehen hierbei den Forschern beratend zur Seite und teilen gerne ihr methodisches und technisches Wissen aus den Bereichen der Nukleinsäure-Aufreinigung und -Amplifikation, sowie der Reportertechnologien.
Amplifikationsprodukte für virale Analysen
qPCR und RT-qPCR
PCR-Reagenzien, einschließlich qPCR- und RT-qPCR, werden zum Nachweis und zur Amplifikation von viralen Zielsequenzen verwendet. Diese Reagenzien sind in virologischen Forschungsstudien weit verbreitet. Das Center for Disease Control and Prevention (CDC) empfiehlt das GoTaq® Probe 1-Step RT-qPCR System als Master Mix im 2019-Novel Coronavirus Real-Time RT-PCR Diagnostic Panel.
PCR Reagenzien und Zubehör
GoTaq® Probe qPCR and RT-qPCR Systems
Ready-to-use master mixes for probe-based qPCR or RT-qPCR.
A6101, A6102, A6120, A6121, A6110
XpressAmp® Direct Amplification Reagents
Fast, RNA extraction-free method to prepare viral samples for PCR-based amplification.
A8882, A8880
SARS-CoV-2 RT-qPCR Kit for Wastewater
Detect SARS-CoV-2 RNA in preprocessed wastewater with high efficiency and sensitivity.
AM2100, AM2110, AM2120, AM2130, AM2140, AM2150, AM2160, AM2170, AM2180, AM2070, AM2050, AM2060
Amplification Application Notes
Direct Amplification from Saliva
Viral RNA detection from Saliva using XpressAmp® lysates: GoTaq® Probe 1-Step RT-qPCR System; Luna® Universal Probe One-Step qPCR Kit
Viral RNA detection from Saliva using SalivaDirect™ and GoTaq® Probe 1-Step RT-qPCR System: CFX; 7500
Direct Amplification from Viral Transport Media
Viral RNA from VTM using XpressAmp® lysates: GoTaq® 1-Step RT-qPCR System
Referenzen
RT-PCR:
Diagne, M. et al. (2020) Dianke virus: A new mesonivirus species isolated from mosquitoes in Eastern Senegal. Virus Research 275, 2 January 2020, 197802.
Alves, M.T. et al. (2018) Mamastrovirus 5 detected in a crab-eating fox (Cerdocyon thous): Expanding wildlife host range of astroviruses. Comparative Immunology, Microbiology and Infectious Diseases 58, 36-43.
qPCR für den Nachweis viraler RNA:
Cai, M. et al. (2020) The R251K Substitution in Viral Protein PB2 Increases Viral Replication and Pathogenicity of Eurasian Avian-like H1N1 Swine Influenza Viruses. Viruses 12(1), 52.
Virale Strukturen und Charakterisierung:
Wicht, O. et al. (2014) Proteolytic Activation of the Porcine Epidemic Diarrhea Coronavirus Spike Fusion Protein by Trypsin in Cell Culture. J. Virol. 88(14), 7952–7961.
Skalierbare Aufreinigungsmethoden für virale Nukleinsäuren
Bewährte Chemie von Promega für die virale Nukleinsäureaufreinigung ist in manuellen bis hin zu automatisierten Verfahren im Bench-Top- oder im High-Throughput- (HT-) Format erhältlich und bietet für jeden Durchsatz die passende Lösung.
Neben den Maxwell® Systemen für die automatisierte Nukleinsäure-Aufreinigung von bis zu 48 Proben in vorgefüllten Kartuschen, gibt es auch HT-Kits für den Hochdurchsatz im 96-Well- oder 384-Well-Format, die mit allen marktüblichen Automationsplattformen kompatibel sind. Zusätzlich bietet Promega eine Vielzahl an Applikationsprotokollen für die manuelle Aufreinigung viraler Nukleinsäuren an. Damit kann eine Vielzahl an Forschungslaboren, die an der Entwicklung von SARS-CoV-2-Nachweistests und an der Erforschung von Lösungen für die COVID-19-Pandemien beteiligt sind, passend zu Ihren Anforderungen unterstützt werden.
Automatisierte Aufreinigung viraler Nukleinsäuren
Maxwell® Geräte in Kombination mit Maxwell® RSC Viral Total Nucleid Acid Purifikation Kits extrahieren virale Nukleinsäuren von bis zu 48 Proben in einem Lauf.
Maxwell® Viral Total Nucleic Acid Purification Kits
Maxwell® RSC Viral Total Nucleic Acid Purification Kit
Viral total nucleic acid extraction from various samples types using the Maxwell® RSC Instrument.
AS1330, ASB1330
Maxwell® CSC Viral Total Nucleic Acid Purification Kit
Viral total nucleic acid extraction from various samples types using the Maxwell® CSC Instruments.
AS1780
Viral RNA/DNA Concentration and Extraction Kits for Wastewater
Reagents and consumables to concentrate and purify total nucleic acids (TNA) in one convenient kit.
A2991, AS1831, AX9190, A3060, A3080
Maxwell® Geräte
Maxwell® RSC Instrument
Benchtop instrument for automated nucleic acid purification with integrated quantitation. For Research Use Only.
AS4500
Maxwell® RSC 48 Instrument
Benchtop instrument for automated nucleic acid purification of 1–48 samples. For Research Use Only.
AS8500
Maxwell® CSC Instrument
Benchtop instrument for automated nucleic acid purification from a range of clinical sample types. For In Vitro Diagnostic Use.
AS6000
Maxwell® CSC 48 Instrument
Benchtop instrument for automated nucleic acid purification from a range of clinical sample types. For In Vitro Diagnostic Use.
AS8000
Reagenzien für die manuelle und automatisierte Hochdurchsatz Nukleinsäure-Aufreinigung
Maxwell® HT Viral TNA Kit, Custom
Das Maxwell® HT Viral TNA Kit verwendet paramagnetische Partikel zur einfachen, automatisierten Aufreinigung mit allen marktüblichen Automationsplattformen. Exemplarische Protokolle gibt es für Tecan-, Hamilton-, Eppendorf- und Thermofisher-Automationsplattformen. Das Maxwell® HT Viral TNA Kit kann auch für die manuelle Aufreinigung in Multiwell-Platten verwendet werden. Entsprechende Applikationsprotokolle finden Sie weiter unten auf dieser Seite.
Bitte kontaktieren Sie uns bezüglich Preisen und Verfügbarkeit.
ReliaPrep™ Viral TNA Miniprep Kit, Custom
Das säulenbasierte ReliaPrep™ Viral TNA Miniprep Kit ist als Custom-Produkt erhältlich und bietet eine schnelle Bearbeitung von Virus-Proben mit Hilfe eines zentrifugationsbasierten Protokolls. Anwendungsbeispiele finden Sie unten in den Application Notes.
Automatisieren und Optimieren mit Experten
Unsere Experten unterstützen Sie gern bei der Hochdurchsatz-Automatisierung viraler RNA-Extraktionsmethoden in Ihrem Labor – Unabhängig von Ihrer Automationsplattform.
Sie haben noch keine Erfahrung mit der Hochdurchsatz-Automatisierung oder brauchen Hilfe bei der Auswahl und Anpassung geeigneter Aufreinigungs-Methoden für virale Nukleinsäuren? Promega unterstützt Sie und arbeitet mit Ihnen zusammen, um Ihr Gerät zu konfigurieren und den Arbeitsablauf entsprechend Ihren Anforderungen zu optimieren.
Applikationsprotokolle zur Extraktion viraler RNA
Manuelle Aufreinigung
ReliaPrep™ Viral TNA Miniprep Kit, Custom
Virale RNA aus einem Transportmedium
Maxwell® HT Viral TNA Kit
Virale RNA aus Sputum (96-well)Virale RNA aus Sputum (Röhrchen)
Maxwell® Geräte
Maxwell® RSC Geräte
Virale RNA aus Transportmedien
Virale RNA aus Körperflüssigkeitens
Maxwell® 16 Geräte
Referenzen
Extraktion viraler RNA mit Hilfe von Maxwell® 48:
Jaeger, A.S. et al. (2018) Zika viruses of both African and Asian lineages cause fetal harm in a vertical transmission model. PLOS Neglected Tropical Diseases doi: 10.1371/journal. pntd.0007343
Chantal Reusken, C. et al. (2019) Toscana, West Nile, Usutu and tick-borne encephalitis viruses: external quality assessment for molecular detection of emerging neurotropic viruses in Europe, 2017. Euro Surveill. Dec 12; 24(50): 1900051.
Wir möchten unsere Kunden in der Diagnostik und Forschung unterstützen. Denn nur mit vereinten Kräften können wir diese Pandemie besiegen.
Reportertechnologien für die Virologie
Luciferase Reporter
Luciferase Reporter eignen sich hervorragend für Wirkstoffscreenings, Untersuchung von Virus-Zell-Interaktionen, Etablierung von in vitro Tests zum Nachweis viraler Antikörper und für das Imaging von Viren in Tiermodellen. Für die Virusforschung eignen sich sowohl die Firefly-Luciferase als auch die NanoLuc®-Luciferase. Die NanoLuc®-Luciferase ist aufgrund ihrer geringen und kompakten Größe insbesondere für die Erstellung von Reporterviren geeignet. Darüber hinaus überzeugt sie durch eine sehr hohe Nachweisempfindlichkeit.
Remdesivir (RDV or GS-5734) wurde zur Behandlung des ersten Falls von SARS-CoV-2 (ehemals 2019-nCoV) in den USA eingesetzt. RDV wurde bisher in keinem Land als Medikament zugelassen, doch seine Nachfrage bei den Behörden zur Behandlung der COVID-19-Patienten steigt weltweit an. Erfahren Sie mehr über die Applikationen der Luciferase-Reporter in der Forschung.
Referenzen
Evaluation der potenziell anti-viralen Wirkstoffe:
Zhang, L. et al. (2020) Alpha-ketoamides as broadspectrum inhibitors of coronavirus and enterovirus replication. Structure-based design, synthesis, and activity assessment. J. Med Chem. DOI: 10.1021/ acs.jmedchem.9b01828. Publication Date (Web): 11 Feb 2020
Sheahan, T.P et al. (2020) Comparative therapeutic efficacy of remdesivir and combination lopinavir, ritonavir, and interferon beta against MERS-CoV. Nature Communications 11, Article number: 222.
Nachweis von viralen Antikörpern im Serum mittels NanoLuc®-Luciferase:
Wang, W. et al. (2019) A novel luciferase immunosorbent assay performs better than a commercial enzyme-linked immunosorbent assay to detect MERS-CoV specific IgG in humans and animals. Biosafety and Health 1(3), 134-143.
Biolumineszentes Imaging der Viren:
Shen, L. et al. (2019) High-Throughput Screening and Identification of Potent Broad-Spectrum Inhibitors of Coronaviruses. DOI: 10.1128/ JVI.00023-19. J. Virol. 93(12), e00023-19.
SARS-CoV-2 Forschung, Impfstoff und therapeutische Entwicklung
Reporter- und Zellviabilitätsassays, RT-qPCR und RNA-Produktionssysteme werden von Forschern für die Untersuchung der viralen Pathogenese zunehmend eingesetzt. Dazu gehören unter anderem das Tracking viraler Nukleinsäuren und Proteine in der Zelle sowie die Untersuchung der Interaktion zwischen Virus- und Wirtszellen, der Zellviabilität und des Metabolismus.
PCR und serologische Tests
Die Entwicklung und Implementierung von präzisen molekularen und serologischen Assays ist ein wichtiger Schwerpunkt vieler Labore weltweit. Promega bietet Produkte und kundenspezifische Lösungen für Labore an, die PCR-basierte molekulare Tests entwerfen, durchführen und normieren und unterstützt Labore, die serologische Assays durchführen und neue serologische Testmethoden erforschen.
Neuigkeiten zum Coronavirus SARS-CoV-2
Zuletzt aktualisiert: 28. April, 2020
The SARS-CoV-2 pandemic presents an ongoing challenge to researchers and public health officials. See below for a regularly updated list of COVID-19 and viral research articles.
Was wir über das neuartige Coronavirus wissen
Wöchentliche Updates mit den aktuellen Nachrichten und neusten Entwicklungen.
Warum sind Antikörper gegen SARS-Cov-2 nicht mit einer Immunität gleichzusetzen?
18. Mai, 2020
ADCC und Fc Effector Funktionen: Überlegungen zur Entwicklung eines COVID-19-Impfstoffs
26. Mai, 2020
Flexible und automatisierte Aufreinigungsmethoden für Ihre Bedürfnisse
14. April, 2020
Der Zytokin-Ansturm: Warum manche COVID-19- Verläufe schwerwiegender sind als andere
17. April, 2020
RiboMAX zur RNA-Produktion und antivirale Medikamente
11. Mai, 2020