Promega-Academy

Erforschen Sie Protein:Protein-Wechselwirkungen mit den vielseitigen Plattformtechnologien NanoBiT^® und NanoBRET™. Untersuchen Sie die Kinetik der reversiblen Homo- und Heterodimerisierung von Proteinen in lebenden Zellen mit dieser biolumineszenten Technologie. Sie spiegeln die dynamische Natur von Protein:Protein-Wechselwirkungen genau wider.

Sie lernen: 

• Was ist NanoBiT^®- und NanoBRET™-Technologie
• Wie man Protein:Protein-Wechselwirkungen untersucht
• Wie Sie diese Assays in Ihrem Labor etabliere

Kombinieren Sie CRISPR-Knock-In-Technologie mit dem HiBiT-Protein-Tagging-System. Diese Kombination ermöglicht die Konstruktion von zellulären Reporter-Assays für eine Vielzahl von Forschungsfragen. Die Vorteile von CRISPR & HiBiT werden anhand von Beispielen zu den Forschungsthemen Proteinabbau und -sekretion, Signaltransduktion und Tötung von Zielzellen veranschaulicht. 

Sie lernen: 

• Wie man CRISPR zur Entwicklung von HiBiT-markierten Proteinen einsetzt
• Die Vorteile von kinetischen Assays in lebenden Zellen und Endoint-Assays
• Wie Sie die HiBiT-Technologie in Ihrem Labor etablieren und nutzen können

Zellbasierte biolumineszente Assays sind Standardmethoden zur Bestimmung von Zellviabilität, Zytotoxizität und Apoptose. Die hohe Sensitivität und der breite lineare Messbereich dieser Assays sind grundlegend für ihre Reproduzierbarkeit. Trotz der Wahl des geeigneten Assay-Typs gibt es weitere Faktoren, die für eine erfolgreiche und reproduzierbare Durchführung zu berücksichtigen sind – angefangen von der richtigen Plattenauswahl bis hin zur Auswahl des richtigen Detektionsmodus.

Sie lernen: 

• Tipps und Tricks für eine optimierte Zellkultur-Routine
• Wie man den besten Zeitpunkt für die Analyse findet
• Wann Sie welchen Detektionsmodus wählen 
• Wie Sie die geeignete Mikrotiterplatte auswählen
• Vorteile von Multiplexing- und Real-Time Assay-Formaten  

Biolumineszierende Reporter sind unverzichtbare Instrumente zur Untersuchung zellulärer Signalwege und der Genexpression. In diesem Seminar führen wir Sie durch die wichtigsten Schritte eines Genreporter-Experiments und geben Ihnen hilfreiche Tipps und Tricks. Durch Anwendungsbeispiele werden die Vorteile von NanoLuc^® Luciferase für Ihre Reporter-Assays aufgezeigt. 

Sie lernen: 

• Wie Sie Reporter-Assays in Ihrer Forschung einsetzen können 
• Welches das beste Reportermolekül für Ihre Anwendung ist 
• Die Vorteile von NanoLuc^® Luciferase 

Cell Health Assays liefern wertvolle Informationen über die Vitalität Ihrer Zellen. Die Anwendungsmöglichkeiten sind vielfältig, z. B. zur Bewertung der Toxizität von Wirkstoffkandidaten, Analyse zellulärer Veränderungen bei Krebs oder Untersuchung grundlegender zellbiologischer Fragestellungen. Dieses Seminar bietet einen Überblick über die neusten Assays zur sensitiven und zuverlässigen Bestimmung von Viabilität, Zytotoxizität und Apoptose.  

Die Inhalte des Seminars sind:

• Überblick über die verschiedenen Assay Formate 
• Was sind Vorteile und Grenzen bei der Assay Auswahl 
• Kinetische Assays für Echtzeitmessungen
• Assays optimiert für 3D-Zellkulturen 
• Wie Sie mehr Daten aus ein und derselben Probe generieren

Dieses Seminar zeigt Ihnen die Möglichkeiten auf, Ihren RT-qPCR Workflow zu optimieren. Schritt für Schritt, entlang der verschiedenen Arbeitsschritte, werden Tipps und Tricks aufgezeigt und mögliche Fehlerquellen aufgedeckt. Von der Planung und Durchführung der Experimente bis hin zur korrekten Analyse und Interpretation der Ergebnisse, am Ende dieses Seminar sind Sie RT-qPCR Experte! 

Sie lernen:

• Tipps & Tricks zu jedem Schritt der RT-qPCR
• Richtige Probenhandhabung und Möglichkeiten der RNA-Extraktion
• Strategien der Reversen Transkription und richtige Enzymwahl
• Vor- und Nachteile verschiedener qPCR Systeme
• Korrekte Datenanalyse

Aufgrund ihrer hohen Komplexität stellt die Entwicklung Antikörper-basierter Biologics eine besondere Herausforderung in der Arzneimittelentwicklung dar. Daher sind zellbasierte funktionelle Assays, die den Wirkmechanismus (Mechanism-of-Action) widerspiegeln, für die Bewertung der Wirkstärke (Potency), Qualitätskontrolle (QC) und der Chargenfreigabe (Lot release) unabdingbar. Dieses Seminar bietet Ihnen einen umfassenden Überblick zu etablierten und innovativen biolumineszenten Reporter-Bioassays zur Untersuchung verschiedenster biologischer Funktionen:

• Fc-Rezeptor vermittelte zelluläre Antworten (wie z.B. ADCC und ADCP)
• Modulation von Immuncheckpoints 
• T-Zellaktivierung 
• Modulation von Zytokin und Wachstumsfaktor vermittelter Signalwege

Der Zellmetabolismus ist ein dynamisches Netzwerk von Stoffwechselvorgängen, das ständiger Regulation durch externe und interne Signale und Stimuli unterliegt. Vor diesem Hintergrund erlaubt die jeweils vorhanden Menge einzelner Metabolite Rückschlüsse auf das aktuelle Stoffwechselgeschehen und den Zustand von Zellen. Das Seminar bietet einen Überblick zu einfachen, nicht-radioaktiven, biolumineszenten Methoden zur Messung metabolischer Änderungen in Ihrer Zellkultur.

Diese Themen erwarten Sie:

• Untersuchung zellulärer Schlüsselmetaboliten, wie Glukose, Laktat, Glutamat
• Detektion von Oxidativem Stress 
• Dinukleotid-Messung
• Messung des Lipidstoffwechsel

Die neue Generation von Immunoassays bietet Ihnen sensitive und quantitative Nachweise von Analyten sowie Interaktionsanalysen. Lumit™ Immunoassays haben einen großen dynamischen Bereich und können in nur 30 Minuten durchgeführt werden, was sie zu einer überzeugenden Alternative zu arbeitsintensiven ELISA- und Western-Blot-Methoden macht. 

Sie werden lernen: 

• Wie Lumit™ Immunoassays Ihre Arbeitsabläufe vereinfachen 
• Wie Sie Lumit™ Immunoassays in der Immunologie, Pharmakologie oder und in der SARS-CoV-2-Forschung anwenden
• Wie Sie Ihre eigenen Lumit™ Immunoassays entwickeln können

• Die Grundlagen der HaloTag^®-Technologie 
• Wie Sie die HaloTag^®-Technologie in Ihrer Forschung einsetzen können 
• Welche zahlreichen Anwendungen wie Proteinaufreinigung, zelluläre Bildgebung oder gezielten Proteinabbau durch HaloTag^® ermöglicht werden.

Die kleine und signalstarke NanoLuc^®-Luciferase dient als Ausgangspunkt für die Entwicklung vielseitiger Proteinreportersysteme. Überwachen Sie die Dynamik von Protein:Protein-Interaktionen mit dem NanoBiT^®-Protein-Tagging-System. Diese Technologie führte zur Entwicklung der Lumit™ Immunoassays, die eine schnelle Quantifizierung von Proteinen in ELISA-ähnlichen Immunoassays ohne Waschschritte ermöglichen.

Sie lernen:

• Wie Sie NanoBiT^® und Lumit™ zur Untersuchung von Proteininteraktionen einsetzen können
• Wie man Proteine mit endogenen Expressionsniveaus quantifiziert 
• Wie Sie diese vielseitigen Technologien in Ihrem Labor einrichten

Eine große Herausforderung ist die Charakterisierung und Optimierung von Degrader-Verbindungen (z. B. PROTACs, IMiDs und “molecular glues”) im Hinblick auf die Wirksamkeit des Abbaus. Gegenwärtig gibt es nur wenige Assays in lebenden Zellen, mit denen die verschiedenen Schritte, die für einen gezielten Proteinabbau erforderlich sind, untersucht werden können. Erfahren Sie mehr über eine Luciferase-basierende Technologieplattform für lebende Zellen, die die Charakterisierung des Wirkmechanismus von Degrader-Verbindungen ermöglicht. 

Sie lernen:  

• Wie die biolumineszente Reportertechnologie die Untersuchung der Proteindynamik ermöglicht
• Wie Sie von unterschiedlichen Endpunkt- oder kinetischen Echtzeit-Assay-Formaten profitieren können 
• Wie Sie die Technologie, schnell in Ihrem Labor etablieren